食用菌原種的滅菌、接種與培養方法簡介

在生產食用菌過程中哪一個環節都非常重要，而滅菌環節則是重中之重，滅不好菌，就有可能全軍覆滅。今天我們介紹一下食用菌原種的滅菌、接種與培養方法，幫助你搞好食用菌的生產。

一、食用菌的滅菌方法

分裝好的原種瓶，要當天滅菌，以免培養基發霉變質。滅菌方法有二種，即高壓蒸汽滅菌和常壓蒸汽滅菌。

食用菌原種的滅菌、接種與培養方法

先將鍋內加入足夠的水，將菌種瓶整齊地排放在鍋內，蓋上鍋蓋，對角擰緊鍋蓋上的螺絲，勿使漏氣。

用電爐或者煤火加熱，當壓力達到0.05兆帕時，打開放氣閥（或開始就打開放氣閥），排空鍋內冷空氣，放氣10-15分鐘左右，再關閉放氣閥繼續加熱，當壓力升到0.15兆帕時，調整火力使壓力維持在0.14-0.15兆帕下滅菌。

麥粒和谷粒培養基滅菌120分鐘；棉籽殼、玉米芯、木屑培養基滅菌90-100分鐘。滅菌完畢，關閉熱源，待壓力自然降到0時，打開放氣閥將鍋內空氣排盡后，再打開鍋蓋取出菌種瓶。

鍋內加足水，先用大火加熱，使蒸汽上足后，用小火保持沸點溫度。在loo℃左右的沸點溫度下維持12-16小時以上，停火燜1夜后出鍋。麥粒和谷粒培養基滅菌時間要相應延長。

為了確保滅菌效果，麥粒和谷粒培養基最好不要采用常壓滅菌法。

將滅過菌的培養基從鍋內取出，置于干凈的室內冷卻，待滅過菌的培養基溫度降至30℃以下時，搬入消毒好的接種箱（室）內消毒接種。

在接種前先對接種場地和接種設施進行徹底的清潔，然后用甲醛加高錳酸鉀或者克霉靈等氣霧消毒劑熏蒸消毒30分鐘。

再將滅過菌的料瓶和接種用具（酒精燈和接種鉤等）一同放入接種室（箱）內，用甲醛加高錳酸鉀再一次進行熏蒸消毒，同時配合紫外燈照射消毒等方法。

首先將母種試管外壁用75%的酒精棉球表面消毒后帶入接種室（箱）；點燃酒精燈，用75%的酒精棉球再次對試管外壁和管口處表面消毒；

取下試管棉塞后，試管口在火焰上燒一下，然后用經火焰滅菌并已冷涼的接種鉤將母種斜面分成6-8份，在酒精燈火焰形成的無菌區內，用接種鉤取一份母種迅速準確地放入料瓶內的接種穴處，棉塞過火后塞好，包上包頭紙。

如此反復，每支母種可擴接原種6-8瓶。接完種，貼上標簽。

將接種好的原種放置培養室內進行培養，培養室要求干燥、黑暗、通風良好，溫度控制在20℃ -24℃，空氣相對濕度在60%左右。培養期間每周檢查1次菌絲生長情況和雜菌發生情況，若發現有污染的菌種瓶應立即淘汰，并隔離污染源。

一般在適溫下30天左右菌絲即可發滿菌種瓶，菌絲長滿后，盡快使用；若暫時不用，也可置于低溫、干燥條件下短期保存。